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TECHNICAL ARTICLES鼠多克隆抗体制备条件——艾柏森生物
鼠多克隆抗体的制备是一个复杂的过程,涉及到多个步骤,主要包括抗原的制备、动物免疫、抗体的纯化和质量控制等环节。以下是制备鼠多克隆抗体的一般条件和步骤:
抗原制备:首先需要确定并制备所需的抗原,这可以是蛋白质、多肽或多糖等。抗原的纯度对抗体的质量至关重要,因为杂质可能导致抗体识别错误的目标。
动物免疫:将抗原注射到小鼠体内以诱导产生特异性抗体。通常,抗原会与佐剂(如弗氏佐剂)混合以增强免疫反应。免疫程序通常包括初次免疫和加强免疫,加强免疫在初次免疫后2-4周进行,以增强免疫效果。
免疫程序:免疫程序可能包括多次注射抗原,以确保充分的免疫反应。注射方式可以是皮下注射、肌肉注射或腹腔注射,具体方法取决于实验设计。
抗体纯化:通过亲和层析等方法从免疫小鼠的血清中纯化出特异性抗体。蛋白A/G亲和层析是一种常用的方法,可以富集免疫球蛋白G(IgG)并去除非特异性IgG。
质量控制:纯化后的抗体需要进行一系列质量检测,包括抗体浓度测定、SDS-PAGE电泳检测纯度以及ELISA法测定效价等,以确保抗体的质量。
抗体储存和稳定性:制备完成的抗体应在适当的条件下储存,以保持其稳定性和活性。避免多次冻融,建议将抗体分装后在-20°C或-80°C下保存,并在2-8°C条件下使用前进行最终稀释。
服务提供:一些公司提供多克隆抗体制备服务,可以根据客户的需求提供定制化的服务,包括免疫原的制备、动物免疫、血清采集和抗体纯化等。
请注意,这些步骤可能根据不同实验室的具体条件和要求有所变化。在实际操作中,应遵循实验室的标准操作程序和相关法规。
上一个:表面等离子共振分析——艾柏森
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